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PCR e qPCR: Teoria, Prática e Análise de Resultados

Datas: 5 e 6 de agosto,4h cada tarde

Local: Bloco B36

Quantidade de vagas: 6 vagas

Ministrantes:

  • Juliana Rodrigues Almeida Coimbra (PBC-UEM)
  • Daniel Caligari (PBC-UEM)
  • Lucas Yudai Nozaki (PBC-UEM)
  • Nivaldo Natalino Banho Junior (PBC-UEM)
  • Jully Jesus De La Cruz Cisneros (PGM-UEM)

Laboratório: Laboratório de Organização Funcional do Núcleo

Docente Responsável: Dra. Maria Aparecida Fernandez.

Resumo do minicurso: Este minicurso intensivo de 8 horas tem como objetivo fornecer uma compreensão abrangente das técnicas de PCR (Reação em Cadeia da Polimerase) e qPCR (PCR em Tempo Real), abordando desde seus fundamentos teóricos até a aplicação prática e análise de resultados. Destinado a estudantes e pesquisadores da área de biologia molecular, o curso combina aulas teóricas e práticas, garantindo uma experiência de aprendizado completa.

Estrutura do Curso:

1. Introdução às Técnicas de PCR e qPCR (2 horas)

  • Histórico e Antecedentes
    • Descoberta da PCR e evolução até a qPCR;
    • Pioneiros e desenvolvimento tecnológico;
  • Componentes Essenciais
    • Enzimas, primers, sondas, nucleotídeos, tampões.
    • Equipamentos e materiais necessários.
  • Fundamentos da PCR e qPCR
    • Princípios básicos da amplificação de DNA;
    • Diferenças entre PCR convencional e qPCR;
  • Metodologias
    • Desenho de primers, configuração de reações, otimização de condições.
  • Análises
    • Interpretação de resultados, controle de qualidade, análise qualitativa e quantitativa;
  • Aplicações das Técnicas
    • Diagnósticos médicos, pesquisa científica, testes de paternidade, entre outros.

2. Realização Prática das Técnicas – ATIVIDADE PRÁTICA (2 horas)

  • Configuração do Laboratório
    • Preparação do ambiente e dos reagentes;
  • Execução da PCR Convencional
    • Passo a passo do protocolo de PCR;
    • Ciclagem térmica e amplificação;
  • Execução da qPCR
    • Preparação da reação;
    • Configuração do equipamento de qPCR;

3. Análises Teóricas de PCR e qPCR (2 horas)

  • Técnica de separação de fragmentos de DNA.
  • Visualização e interpretação de bandas.
  • Diferenças entre análise relativa e absoluta.
  • Métodos de quantificação e cálculos de eficiência.
  • Introdução aos programas de análise de dados de qPCR.
  • Interpretação de curvas de amplificação e curva de melting.
  • Eletroforese
  • Análise Quantitativa e Qualitativa
  • Softwares e Ferramentas

 4. Análise de Resultados das Reações Realizadas pelos Alunos – ATIVIDADE PRÁTICA (2 horas)

  • Interpretação de Dados
    • Análise dos resultados obtidos durante a prática.
    • Identificação de possíveis erros e correções.
  • Discussão dos Resultados
    • Comparação entre resultados esperados e obtidos.
    • Troca de experiências e esclarecimento de dúvidas.
  • Conclusões e Encerramento
    • Resumo dos pontos principais do curso.

Este minicurso oferece uma visão completa das técnicas de PCR e qPCR, proporcionando aos participantes não só o conhecimento teórico, mas também a experiência prática necessária para aplicar essas técnicas em suas pesquisas e trabalhos profissionais.